1、從基因文庫(kù)中獲取目的基因；2、cDNA文庫(kù)；3、反轉(zhuǎn)錄法；4、人工合成法 。目的基因，也稱(chēng)靶標(biāo)基因 ， 是指在實(shí)驗(yàn)中研究或操縱的特定基因 。在基因克隆過(guò)程中目的基因就是要分離、純化、克隆并轉(zhuǎn)化到生物體的那個(gè)可以帶來(lái)預(yù)期表型性狀如抗蟲(chóng)或耐除草劑的基因 。
目的基因獲得方法是取得含有所需生物學(xué)功能或編碼所需產(chǎn)物結(jié)構(gòu)基因的DNA片段的方法 。1969年貝克威思等從大腸桿菌中分離出了乳糖操縱子DNA，以后有不少科學(xué)家用生物學(xué)方法、物理化學(xué)方法分離出許多純化的基因 。但總的來(lái)看為數(shù)不多 。
【目的基因的4種獲取方法】1970年首次完成了77對(duì)堿基的酵母丙氨酸t(yī)RNA基因的全合成；1973年又合成了126對(duì)堿基的酪氨酸t(yī)RNA的結(jié)構(gòu)基因 。但上述兩次合成的基因都不能得到表達(dá) 。1976年8月成功地合成了能表達(dá)功能的人工基因——193對(duì)堿基的大腸桿菌酪氨酸t(yī)RNA基因 。自此以后人工合成基因的報(bào)道不斷出現(xiàn) 。
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